Flt3-лиганд (FL) представляет собой недавно идентифицированный гематопоэтический цитокин, активность которого опосредуется связыванием с трансмембранным гликопротеином Flt3. Flt3 был впервые обнаружен как член подсемейства рецепторных тирозинкиназ (RTK) класса III, экспрессия которого среди гемопоэтических клеток, как было обнаружено, ограничена высокообогащенными популяциями стволовых / предшественников. Кроме того, RTK класса III включают рецепторы из SCF, M-CSF и PDGF. Неудивительно, что Flt3-лиганд также структурно родственен M-CSF и SCF. Было показано, что все три цитокина существуют как в виде трансмембранных белков типа I, так и в виде растворимых белков. Преобладающая изоформа FL человека представляет собой трансмембранный белок, который может подвергаться протеолитическому расщеплению с образованием растворимой формы белка. Также была идентифицирована альтернативно сплайсированная мРНК FL, кодирующая растворимую форму FL человека. FL широко экспрессируется в различных тканях человека и мыши. На уровне аминокислотной последовательности FL человека и мыши примерно на 72% идентичны, и два белка проявляют межвидовую активность. Было показано, что FL взаимодействует с широким спектром гемопоэтических цитокинов, стимулируя рост и дифференцировку ранних гемопоэтических клеток-предшественников.
Источник
Кишечная палочка.
Молекулярная масса
Примерно 17.6 кДа, одна негликозилированная полипептидная цепь, содержащая 155 аминокислот.
Биологическая активность
Полностью биологически активный по сравнению со стандартом. ED50, определенная с помощью анализа пролиферации клеток с использованием человеческих клеток AML5, составляет менее 1.0 нг / мл, что соответствует удельной активности> 1.0 × 106 МЕ / мг.
Внешний вид
Стерильный фильтрованный белый лиофилизированный (лиофилизированный) порошок.
Формулировка
Лиофилизирован из отфильтрованного 0.2 мкм концентрированного раствора в PBS, pH 7.0.
эндотоксин
Менее 0.01 EU / мкг rHuFlt3-лиганда GMP, как определено методом LAL.
Восстановление
Мы рекомендуем кратковременно центрифугировать этот флакон перед открытием, чтобы довести содержимое до дна. Развести в стерильной дистиллированной воде или водном буфере, содержащем 0.1% BSA, до концентрации 0.1–1.0 мг / мл. Исходные растворы следует разделить на рабочие аликвоты и хранить при температуре ≤ -20 ° C. Дальнейшие разведения следует проводить в соответствующих буферных растворах.
Стабильность и хранение
Используйте морозильную камеру для ручного размораживания и избегайте повторяющихся циклов замораживания-оттаивания. Минимум 12 месяцев при хранении при температуре ≤ -20 ° C при поставке. См. Сертификат подлинности партии для использования по дате. 1 месяц, от 2 до 8 ° C в стерильных условиях после восстановления. 3 месяца, от -20 до -70 ° C в стерильных условиях после восстановления.
Рекомендации
1. Хасейн-Бей С., Базиль Г.Д., Лемерль Дж. и др. 1998. Кровь, 92: 4090-7.2. Петерс М., Солем Ф., Гольдшмидт Дж. и др. 2001. Exp Hematol, 29: 146-55.3. Бек С., Фонтанет А., Тезе Дж. и др. 2004. СПИД, 18: 2089-91.4. Махадеван Д., Чой Дж., Кук Л. и др. 2009. Hum Genomics Proteomics, 2009: 453634.